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世界竹藤通讯  2016, Vol. 14 Issue (2): 1-5     https://doi.org/10.13640/j.cnki.wbr.2016.02.001
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麻竹DlSCL6基因amiRNA前体合成及表达载体构建
陈东亮1,2, 孙化雨2, 李利超2, 赵韩生2, 高志民2
1 北京市农林科学研究院 北京农业生物技术研究中心 北京 100097;
2 国际竹藤中心 国家林业局竹藤科学与技术重点实验室 北京 100102
Synthesis and Expression Vector Construction of amiRNA Precursor for DlSCL6 in Dendrocalamus latiflorus
Chen Dongliang1,2, Sun Huayu2, Li Lichao2, Zhao Hansheng2, Gao Zhimin2
1 Beijing Key Laboratory of Agricultural Genetic Resources and Biotechnology, Beijing Agro-Biotechnology Research Center, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China;
2 International Center for Bamboo and Rattan, Key Laboratory on the Science and Technology of Bamboo and Rattan, Beijing 100102, China
全文: PDF(409 KB)   HTML
输出: BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 Web MicroRNA Designer (WMD3)是一个专门应用于植物人工miRNA设计和前体序列设计的专业网站,其中利用重叠PCR法合成amiRNA前体序列,涉及多个PCR和纯化回收过程,步骤繁琐,周期较长。本研究利用WMD3设计了麻竹转录因子DlSCL6基因的人工miRNA序列和其前体序列,采用改进的重叠PCR方法,快速克隆获得了该前体序列,并以改造的pCMABIA1301载体为框架,构建了该前体的植物表达载体,为进一步研究利用amiRNA调控SCL6基因的表达奠定了基础。
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陈东亮
孙化雨
李利超
赵韩生
高志民
关键词 麻竹人工miRNA重叠PCR表达载体构建    
Abstract:Web MicroRNA Designer (WMD3) is a professional website specially used for sequence design of plant artificial miRNA and its precursor. Overlap PCR method was used for the synthesis of amiRNA precursor sequence, which involved multiple PCR purifications and recovery processes with complicated steps and a longer period. In this study, sequences of plant artificial miRNA and its precursor for DlSCL6 in Dendrocalamus latiflorus were designed according to WMD3 and an improved method of overlapping PCR was used for quickly cloning of the precursor sequence. Based on the frame of pCMABIA1301 vector, the expression vector of amiRNA precursor for DlSCL6 was constructed, which laid a foundation for further study in the expression regulation of SCL6 using amiRNA.
Key wordsDendrocalamus latiflorus    amiRNA    overlap PCR    construction of expression vector
     出版日期: 2018-05-21
基金资助:国家林业公益性行业科研专项经费项目(编号:201504106);"十二五"国家科技支撑计划专题(编号:2012BAD23B0504)。
通讯作者: 高志民,男,研究员,博士生导师,研究方向为竹藤生长发育的分子基础。E-mail:gaozhimin@icbr.ac.cn。     E-mail: gaozhimin@icbr.ac.cn
作者简介: 陈东亮,男,博士,助理研究员,研究方向为花卉分子育种。E-mail:dlchen1984@126.com。
引用本文:   
陈东亮, 孙化雨, 李利超, 赵韩生, 高志民. 麻竹DlSCL6基因amiRNA前体合成及表达载体构建[J]. 世界竹藤通讯, 2016, 14(2): 1-5.
Chen Dongliang, Sun Huayu, Li Lichao, Zhao Hansheng, Gao Zhimin. Synthesis and Expression Vector Construction of amiRNA Precursor for DlSCL6 in Dendrocalamus latiflorus. World Bamboo and Rattan, 2016, 14(2): 1-5.
链接本文:  
http://www.cafwbr.net/CN/10.13640/j.cnki.wbr.2016.02.001      或      http://www.cafwbr.net/CN/Y2016/V14/I2/1
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